醫(yī)生在評(píng)職稱的時(shí)候都需要發(fā)表一些醫(yī)學(xué)職稱論文，不同科室的醫(yī)生對醫(yī)學(xué)的研究方向也不相同。本文是小編給大家推薦的一篇醫(yī)學(xué)期刊投稿的論文范文，主要針對流式細(xì)胞儀檢測缺鐵性貧血患者淋巴細(xì)胞免疫表型進(jìn)行了一些探討。

　　【摘要】 目的 研究缺鐵性貧血(IDA)患者外周血淋巴細(xì)胞免疫表型的變化。方法 30例缺鐵性貧血患者(IDA組)和30例健康體檢者(正常對照組)， 均應(yīng)用流式細(xì)胞儀三色直接免疫熒光法檢測淋巴細(xì)胞免疫表型。對兩組外周血淋巴細(xì)胞免疫表型進(jìn)行比較。結(jié)果 IDA組外周血中CD3+、CD3+CD4+及CD4+/CD8+比值顯著低于正常對照組(P<0.01)， CD3+ CD8+值高于正常對照組(P<0.05)。結(jié)論 缺鐵性貧血患者影響機(jī)體T細(xì)胞的增殖分化， 導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能障礙和免疫調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂。

　　【關(guān)鍵詞】 缺鐵性貧血,淋巴細(xì)胞免疫表型,流式細(xì)胞儀,骨髓細(xì)胞學(xué)檢查

　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.14.009

　　Investigation of flow cytometry in examination of lymphocyte immunophenotyping in iron-deficiency anemia patients YANG Hong， MENG Yan， WANG Chao. Department of Inspection， Beijing Fengtai Hospital， Beijing 100070， China

　　【Abstract】 Objective To research the changes of lymphocyte immunophenotyping in iron-deficiency anemia (IDA) patients. Methods There were 30 iron-deficiency anemia patients (IDA group) and 30 healthy people (normal control group)， and they all received flow cytometry three-color direct immunofluorescent method for detection of lymphocyte immunophenotyping. Comparison was made on the peripheral blood lymphocyte immunophenotyping between the two groups. Results IDA group had much lower levels of CD3+、CD3+CD4+， and CD4+/CD8+ ratio in peripheral blood than the normal control group (P<0.01)， and it also had higher CD3+ CD8+ value than the normal control group (P<0.05). Conclusion Iron-deficiency anemia may affect proliferation and differentiation of T lymphocyte， resulting in decreased immune functions and immune regulatory dysfunction.

　　【Key words】 Iron-deficiency anemia; Lymphocyte immunophenotyping; Flow cytometry; Marrow cytology examination

　　缺鐵性貧血是因機(jī)體鐵的需要量增加和鐵吸收減少， 使體內(nèi)儲(chǔ)存鐵耗盡而缺乏， 又未得到足夠的補(bǔ)充， 導(dǎo)致合成血紅蛋白的鐵不足而引起的貧血[1]。是人類最常見的慢性疾病之一。淋巴細(xì)胞免疫表型是了解機(jī)體免疫系統(tǒng)功能的狀態(tài)。在正常機(jī)體內(nèi)各淋巴細(xì)胞亞群的相互作用， 維護(hù)著機(jī)體正常的免疫功能， 當(dāng)淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異常時(shí)， 都可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂并發(fā)生一系列的病理變化[2]。淋巴細(xì)胞免疫表型的分析對一些疾病的診斷、治療、免疫功能重建、器官移植監(jiān)測等有重要的臨床意義[3]。流式細(xì)胞儀檢測缺鐵性貧血與淋巴細(xì)胞免疫表型的關(guān)系， 國內(nèi)外報(bào)道較少。現(xiàn)將本院2012年1月～2014年12月收治的30例IDA患者進(jìn)行了外周血淋巴細(xì)胞免疫表型(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+及CD4+/CD8+)的檢測， 并與正常人對照。現(xiàn)報(bào)告如下。

　　1 資料與方法

　　1. 1 一般資料 30例IDA患者作為IDA組， 男5例， 女25例， 年齡23～81歲， 中位年齡46.5歲。血紅蛋白48～92 g/L， 紅細(xì)胞(3.24～4.76)×1012/L， 網(wǎng)織紅細(xì)胞0.1%～1.0%， 外周血紅細(xì)胞呈小細(xì)胞低色素性改變。骨髓細(xì)胞學(xué)檢查示：骨髓增生明顯活躍-活躍， 粒/紅比值1.91～4.37， 紅系增生活躍， 以中晚幼紅細(xì)胞為主， 晚幼紅細(xì)胞核固縮明顯。成熟紅細(xì)胞大小不等， 以小者居多， 中心淡染區(qū)明顯擴(kuò)大。骨髓細(xì)胞鐵染色：外鐵(-)， 細(xì)胞內(nèi)鐵為0～13%， 骨髓報(bào)告：符合缺鐵性貧血骨髓象。血清鐵2.51～11.5 mol/L， 血清鐵蛋白3.15～12.4 ng/L。全部病例服用鐵劑治療有效。另選健康體檢者30例作為正常對照組， 其中男10例， 女20例， 為血常規(guī)、血清鐵、鐵蛋白各項(xiàng)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)， 且無其他器質(zhì)性病變。兩組一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)， 具有可比性。

　　1. 2 儀器與試劑 采用美國BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀， 三色標(biāo)記McAb：CD3FITC/CD4PE/CD45PerCP、CD3FITC/CD8PE/CD45PerCP、紅細(xì)胞裂解液、熒光校準(zhǔn)微球 calibrate 3 Beads均購自美國BD公司。 　　1. 3 方法

　　1. 3. 1 樣品的制備 各管分別加入CD3FITC/CD4PE/CD45 PerCP、CD3FITC/CD8PE/CD45PerCP熒光抗體20 μl， 再分別加入新鮮EDTA-K3抗凝外周血100 μl， 混勻， 室溫避光孵育 20 min， 加入 1∶9 配制的溶血素 2 ml， 避光 10 min。2000 r/min 離心5 min， 倒掉上清液， 加入 PBS 緩沖液 2 ml， 2000 r/min 離心5 min。去上清， 加入500 μl PBS混勻待測。

　　1. 3. 2 流式細(xì)胞儀測定 以熒光微球calibrite 3-colour校準(zhǔn)儀器補(bǔ)償、使儀器分辨率CV<2%達(dá)到最佳工作狀態(tài)， 采用MultiSET 軟件獲取數(shù)據(jù)。建立SSC/CD45Percp、CD4PE/CD3 FITC、SSC/CD3FITC熒光點(diǎn)圖， 用CD45-PerCP/SSC-Gating和Back-Gating 細(xì)胞群雙圈門以排除碎片的干擾， 調(diào)節(jié) FSC、SSC、Detectors/Amps、Copensation， FL1-FL 2% 、FL2-FL 1% 熒光補(bǔ)償， 每管獲取1.5萬個(gè)細(xì)胞， 建立CD4+/CD3+、CD8+/CD3+散點(diǎn)圖， Th(CD4+)和Ts(CD8+)的表達(dá)情況， 同時(shí)計(jì)算出 Th/Ts 比值。

　　1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2 結(jié)果

　　IDA組外周血中CD3+、CD3+CD4+及CD4+/CD8+比值顯著低于正常對照組(P<0.01)， CD3+CD8+值高于正常對照組(P<0.05)。見表1。

　　3 討論

　　3. 1 缺鐵性貧血是一種全球性疾病， 雖然隨著現(xiàn)代物質(zhì)生活條件的改善， 各種營養(yǎng)缺乏性疾病已大為減少， 但缺鐵性貧血仍然是人們所面臨的威脅健康的一大難題[3]。為了了解缺血性貧血對機(jī)體免疫系統(tǒng)功能的影響， 本試驗(yàn)通過流式細(xì)胞儀三色免疫標(biāo)記法觀察30例成人缺鐵性貧血外周血淋巴細(xì)胞免疫表型的變化， 總結(jié)出缺鐵性貧血主要影響機(jī)體的細(xì)胞免疫功能， 可引起細(xì)胞免疫功能障礙和免疫調(diào)節(jié)紊亂[4]。

　　3. 2 淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)的重要組成部分， 在人體細(xì)胞免疫中發(fā)揮核心作用。T 細(xì)胞免疫主要通過T 細(xì)胞的增殖分化來實(shí)現(xiàn)， 這是一個(gè)消耗能量、依賴核酸及蛋白質(zhì)合成的復(fù)雜過程[5]。CD3+ CD4+ T 細(xì)胞是輔助性/誘導(dǎo)性T淋巴細(xì)胞(Th細(xì)胞)， 也是遲發(fā)性超敏反應(yīng)的啟動(dòng)者、促使B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的輔助細(xì)胞、抑制性T淋巴細(xì)胞的誘導(dǎo)細(xì)胞;CD3+CD8+ T 細(xì)胞是抑制性/細(xì)胞毒性T細(xì)胞(Ts細(xì)胞)， 是細(xì)胞毒性T 細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞， 也是抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的抑制性細(xì)胞; 當(dāng)CD4+/CD8+比值發(fā)生變化時(shí)， 可引起機(jī)體免疫功能降低[6]。從而影響淋巴細(xì)胞的增殖和分化， 使T淋巴細(xì)胞功能受損， 導(dǎo)致免疫功能低下和免疫調(diào)節(jié)紊亂[7]。

　　3. 3 缺鐵性貧血可對多系統(tǒng)造成危害， 但對免疫功能的具體影響具有爭議。Salaman 等[8]認(rèn)為， IDA 可影響人體整個(gè)免疫系統(tǒng)， 使特異性和非特異性免疫功能均下降; 本研究從機(jī)體免疫功能角度出發(fā)， 分析IDA 對人體免疫功能的影響， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)IDA 患者CD3+、CD3+CD4+T細(xì)胞比例減少、CD3+CD8+ T 細(xì)胞比例升高， 提示IDA影響T細(xì)胞的增殖分化， 導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能障礙和免疫調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂[9]。

　　參考文獻(xiàn)

　　[1] 張之南， 沈悌. 血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn). 北京： 科學(xué)出版社， 2007：6-9.

　　[2] 王建中. 流式細(xì)胞術(shù)分析血液淋巴細(xì)胞免疫表型方法學(xué)研究. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2000， 23(4)：203-206.

　　[3] 王臘梅， 周紅彬. 3～6歲缺鐵性貧血患兒免疫功能變化研究 . 西南軍醫(yī)， 2004， 6(4)：9-10.

　　[4] 禮征南， 王亞男， 董敏， 等. T-淋巴細(xì)胞亞群在血液病中的診斷應(yīng)用. 中國醫(yī)藥前沿， 2010， 5(4)：63-64.

　　[5] 羅運(yùn)貴， 包勇， 羅媛， 等. 缺鐵性貧血患兒123 例免疫功能低下相關(guān)分析. 四川醫(yī)學(xué)， 2002， 23(11)：1189-1190.

　　[6] 吳斌， 楊濱， 陳素清. 缺鐵性貧血患兒腺苷脫氨酶活性改變 . 中華血液學(xué)雜志， 1997， 18(6)：332-333.

 

　　醫(yī)學(xué)期刊推薦《新醫(yī)學(xué)》創(chuàng)刊于1969年。辦刊30多年來，其內(nèi)容一直以內(nèi)兒科為主、兼顧各科。讀者對象為各級(jí)基層醫(yī)療單位的臨床醫(yī)師服務(wù)。本刊以辦精品刊物為目標(biāo)，腳踏實(shí)地，求實(shí)創(chuàng)新，與時(shí)俱進(jìn)，為我國醫(yī)學(xué)事業(yè)的發(fā)展作出了自己應(yīng)有的貢獻(xiàn)。 長期以來，《新醫(yī)學(xué)》堅(jiān)持“通過形式多樣的欄目，幫助讀者掌握醫(yī)學(xué)新信息，提高診療水平”的辦刊宗旨，將雜志辦得獨(dú)具特色。在眾多醫(yī)學(xué)專業(yè)期刊中，以突出醫(yī)學(xué)專業(yè)知識(shí)的繼續(xù)教育、可讀性強(qiáng)而著稱。